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RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

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線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱(chēng)量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣(mài)GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:

1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。

2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。

歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專(zhuān)業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專(zhuān)業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專(zhuān)業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)⑻峁┫嚓P(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣(mài)除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī)。

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湖北氫氣氣體探測(cè)儀銷(xiāo)售代理

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手持 等 38 人贊同該回答

手持式氣體探測(cè)儀是一種便攜式的儀器設(shè)備,用于檢測(cè)和測(cè)量空氣中的各種氣體濃度。它的作用主要有以下幾個(gè)方面:1. 安全監(jiān)測(cè):手持式氣體探測(cè)儀可以用于監(jiān)測(cè)和檢測(cè)危險(xiǎn)氣體的存在和濃度,如有毒氣體、可燃?xì)怏w、爆 。

杭州激光測(cè)距傳感器供應(yīng)商家
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第1樓
雪崩 等 63 人贊同該回答

雪崩光電二極管作為重要的光電轉(zhuǎn)換元件之一,在激光測(cè)距傳感器中發(fā)揮著重要的作用。首先,雪崩光電二極管能夠高效地將接收到的激光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。當(dāng)激光束照射到目標(biāo)物體并反射回傳感器時(shí),雪崩光電二極管會(huì)將光 。

連云港市免水式生態(tài)環(huán)保廁所美化
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第2樓
如何 等 41 人贊同該回答

如何選擇適合自己環(huán)保移動(dòng)廁所?人工打包式機(jī)械廁所:使用條件大范圍,結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單,適合95%的人群使用。電動(dòng)打包式機(jī)械廁所:相對(duì)于人工打包式移動(dòng)廁所,這款更加適合大眾化或臨時(shí)使用,但是由于需要電力支持, 。

貴州多糖發(fā)酵壓縮空氣過(guò)濾系統(tǒng)不銹鋼316L濾芯
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第3樓
空氣 等 63 人贊同該回答

空氣總過(guò)濾器、預(yù)過(guò)濾器和精過(guò)濾器依次或部分設(shè)置在空壓機(jī)出口段??傔^(guò)濾器濾芯采用纖維濾紙或增強(qiáng)玻纖折疊而成筒式濾芯,具有過(guò)濾面積大、壓差小、流量大以及壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),是替代傳統(tǒng)棉花活性炭過(guò)濾器經(jīng)濟(jì)又可行的 。

平?jīng)鲕泦⒖刂破麂N(xiāo)售公司電話
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第4樓
為什 等 42 人贊同該回答

為什么要用變頻器操控電機(jī)?咱們先簡(jiǎn)略的了解下這兩個(gè)設(shè)備。電機(jī)是一個(gè)理性負(fù)載,它阻止電流的改變,在發(fā)動(dòng)的時(shí)分會(huì)發(fā)生電流的較大改變。變頻器,是使用電力半導(dǎo)體器材的通斷效果將工頻電源變換為另一頻率的電能操控 。

浙江半導(dǎo)體芯片高低溫試驗(yàn)箱廠家匯總
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第5樓
步入 等 73 人贊同該回答

步入式高低溫濕熱試驗(yàn)箱在汽車(chē)配件制造中主要的應(yīng)用場(chǎng)景有哪些?汽車(chē)配件是汽車(chē)的重要組成部分,對(duì)其進(jìn)行環(huán)境測(cè)試和可靠性驗(yàn)證是非常必要的。步入式高低溫濕熱試驗(yàn)箱能夠模擬不同的環(huán)境條件,包括高溫、低溫、潮濕、 。

寶山區(qū)抖音代發(fā)倉(cāng)儲(chǔ)供應(yīng)
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第6樓
過(guò)程 等 91 人贊同該回答

過(guò)程中的任何中間點(diǎn)(倉(cāng)庫(kù)或配送中心)只實(shí)現(xiàn)收發(fā)貨的功能而消除貨物存儲(chǔ)與訂單獲取功能。越庫(kù)主要是針對(duì)易變或時(shí)間繳感性貨物,在物流配送領(lǐng)域已取得成功應(yīng)用,被沃爾瑪、家得寶、聯(lián)邦快遞等企業(yè)運(yùn)用。越庫(kù)配送避免 。

倉(cāng)儲(chǔ)供應(yīng)
倉(cāng)儲(chǔ)供應(yīng)
第7樓
自身 等 25 人贊同該回答

自身承擔(dān)有關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)性也很,但在與第三方云倉(cāng)公司合作后,倉(cāng)庫(kù)的一部分貨運(yùn)物流風(fēng)險(xiǎn)性能夠由倉(cāng)儲(chǔ)公司承擔(dān),減少企業(yè)運(yùn)營(yíng)的風(fēng)險(xiǎn),能夠互利互惠。盡管倉(cāng)儲(chǔ)伴隨著人類(lèi)進(jìn)步走過(guò)了漫長(zhǎng)的歷程,但是,當(dāng)我們現(xiàn)在討論物流的 。

貴州多糖發(fā)酵壓縮空氣過(guò)濾系統(tǒng)不銹鋼316L濾芯
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第8樓
空氣 等 53 人贊同該回答

空氣總過(guò)濾器、預(yù)過(guò)濾器和精過(guò)濾器依次或部分設(shè)置在空壓機(jī)出口段??傔^(guò)濾器濾芯采用纖維濾紙或增強(qiáng)玻纖折疊而成筒式濾芯,具有過(guò)濾面積大、壓差小、流量大以及壽命長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),是替代傳統(tǒng)棉花活性炭過(guò)濾器經(jīng)濟(jì)又可行的 。

四川線上畫(huà)畫(huà)學(xué)習(xí)價(jià)格
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第9樓
學(xué)習(xí) 等 37 人贊同該回答

學(xué)習(xí)繪畫(huà)需要耐心和毅力。繪畫(huà)是一種非常細(xì)致的藝術(shù)形式,需要我們花費(fèi)大量的時(shí)間和精力來(lái)完成。通過(guò)學(xué)習(xí)繪畫(huà),我們可以培養(yǎng)耐心和毅力,讓我們更加堅(jiān)定地追求自己的夢(mèng)想。學(xué)習(xí)繪畫(huà)可以讓我們提高繪畫(huà)技能。繪畫(huà)是一 。

東營(yíng)整流橋模塊生產(chǎn)廠家
東營(yíng)整流橋模塊生產(chǎn)廠家
第10樓
設(shè)置 等 15 人贊同該回答

設(shè)置瞬態(tài)峰值抑制電路的目的是抑制在開(kāi)關(guān)操作狀態(tài)期間由開(kāi)關(guān)輸出電路產(chǎn)生的瞬時(shí)峰值脈沖干擾信號(hào)。對(duì)于使用雙向晶閘管開(kāi)關(guān)輸出電路的交流固態(tài)繼電器,瞬態(tài)峰值抑制電路通常是由電阻器和電容器組成的串聯(lián)吸收電路,以 。

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